J Clin Invest：揭示USP9X去泛素化ALDH1A3并持续GCSs的间充质特性

质母线粒体瘤（GBM）是最常见和破坏病态的大脑恶病态，其构造在于普遍的内异质病态。尽管已经有在多模式疗程上都获得了成果，但GBM病人的结果始终令人沮丧。GBM持有一个线粒体亚群，叫做GBM干线粒体（GSCs），带有自我升级活病态和多向同化潜能以及起始灵活病态。因此，迫切需要揭示针对GSC的新的疗程策略。并且，醛脱氢酶（ALDH）超家族包括19种酶，它们将内源和外源醛代谢成相应的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，参与人体线粒体的各种病理更进一步。越来越多的证据暗示，ALDH1A3在癌症干线粒体（CSCs）中都表现出高活病态，并影响这些线粒体内的各种分子生物学构造。在GBM中都，已发现ALDH1A3作为维持间充质（MES）GSC的自我升级和致瘤病态的决定病态小分子。然而，MES GSCs中都ALDH1A3亢进的前提始终是神秘的。2019年4月末8日，南京医科大学第一附属医院王慧博团队等人在The Journal of Clinical Investigation上刊登篇文章“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的短文，发现USP9X是一种似乎的DUB，可适度ALDH1A3多NAD化和稳定化。并且，USP9X是预测ALDH1A3hi MES GSCs掺入的决定病态小分子，是MES GSCs自我升级和致瘤病态所必需的。同时还指标了USP9X抑制对病人来源的MES GSC外星人复刻模型的潜在治果。为了确定ALDH1A3抗原到底被NAD - 抗原酶体系统（UPS）中文翻译后控制，学术研究人员首先常用放线菌酮（CHX）阻断抗原质从头合成并HEK293T线粒体和正常人星形质线粒体（NHAs）中都的ALDH1A3抗原质高水平。实际上，ALDH1A3在CHX处理的8天内内逐渐分解并几乎检测勉强。此外，用抗原酶体抑制剂MG-132处理线粒体所致ALDH1A3抗原高水平孝着减小。这些数据暗示ALDH1A3通过UPS分解。接下来，学术研究人员寻求断定负责ALDH1A3稳定化的潜在DUB，并常用核酸HEK293T线粒体中都的98DUB的siGENOMERTF文库进行RNAi挑选。该学术研究初始挑选断定了与ALDH1A3表达出来关的的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293线粒体中都的ALDH1A3共表达出来时，发现只有USP9X能够与介导ALDH1A3直接相互作用，从而暗示USP9X是控制ALDH1A3特病态的孝着候选物。为了测试这一点，将Flag标记的WT USP9X或甲醇失活的混种C1566A USP9X（在甲醇结构域的一个决定病态半胱氨酸中都收纳点突变）转染到HEK293T线粒体中都。 WT USP9X而非C1566A混种的表达出来以mg依赖病态方式减小ALDH1A3抗原高水平，暗示USP9X以依赖于其DUB活病态的方式适度ALDH1A3。质母线粒体瘤（GBM）干线粒体（GSC）的间充质（MES）亚型代表癌线粒体亚群，其因其总体侵袭病态和对常规替代疗法的抗病态而闻名。已经有已提出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为维持GSC的MES构造的决定病态密切关的。然而，支持间歇病态ALDH1A3表达出来的前提始终难以捉摸。在该学术研究中都，学术研究人员发现NAD特异病态抗原酶9X（USP9X）是MES GSC中都ALDH1A3的似乎去NAD化酶。 USP9X与ALDH1A3相互作用，裂解并稳定化。此外，学术研究结果孝示FACS分选的USP9Xhi线粒体掺入带有高ALDH1A3活病态和必需致瘤灵活病态的MES GSC。USP9X的消耗孝着下调ALDH1A3，所致MES GSC的自我升级和致瘤灵活病态的忽视，这可以通过ALDH1A3的异位表达出来得到很大以往的补救。此外，学术研究人员还证明USP9X抑制剂WP1130可借ALDH1A3分解并且在MES GSC衍生的原位外星人复刻模型中都孝示出孝着的疗程功效。另外，USP9X与上皮细胞人GBM混合物中都的ALDH1A3表达出来强烈关的，并且对于带有MES亚组的病人带有预后价值。总的来说，学术研究结果揭示了USP9X作为ALDH1A3抗原稳定化的决定病态去NAD化酶和GSC定向疗程的潜在小小分子。原始出处：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019